基金項目:北冬蟲(chóng)夏草瓶栽栽培技術(shù)及品質(zhì)標準
基金項目甘肅省教育廳項目循環(huán)農業(yè)模式下幾種食用菌栽培關(guān)鍵技術(shù)研究及推廣(2015A-207);蘭州市科技局項目蛹蟲(chóng)草人工栽培關(guān)鍵技術(shù)研究及推廣(2016-3-2);蘭州市人才創(chuàng )新創(chuàng )業(yè)項目幾種食(藥)用微生物重離子輻照及誘變育種(2015-RC-21)。
北冬蟲(chóng)夏草是蟲(chóng)草屬模式種,又名蛹蟲(chóng)草、北蟲(chóng)草,是一種藥用真菌,與冬蟲(chóng)夏草同屬不同種,其主要藥用成分蟲(chóng)草菌素、蟲(chóng)草酸、蟲(chóng)草多糖等均高于冬蟲(chóng)夏草,而且比冬蟲(chóng)夏草更易于人工栽培。早在1986 年就實(shí)現了人工栽培,并在實(shí)踐過(guò)程中創(chuàng )造了多種栽培模式。
當前北冬蟲(chóng)夏草主要的人工栽培模式有2 種,一種是以活的蠶蛹作培養基的蟲(chóng)體模式;一種是利用大米、小麥等作培養基的代料栽培模式。本文總結北冬蟲(chóng)夏蟲(chóng)代料栽培法,以實(shí)現北冬蟲(chóng)夏草的規?;a(chǎn)。
1 栽培場(chǎng)所和季節選擇
北冬蟲(chóng)夏草栽培場(chǎng)所要求周邊環(huán)境干凈無(wú)污染源、水電方便。培養室可以選用通風(fēng)好、光照適宜的空置房屋或大棚。為了充分利用空間,在棚、室內搭建層架,每個(gè)層架的寬度為30 cm,能臥式擺放2 個(gè)750 mL 的罐頭瓶;層距50 cm左右,太高栽培瓶放置不穩固;層架長(cháng)度以有效利用空間為宜,一般每個(gè)層架長(cháng)度不超過(guò)1.5 m;每個(gè)層架最高不超過(guò)5 層[吉山花瑤]。
根據自然溫度,在我國北方,春、秋2 季是適宜的栽培季節。春季2—3 月、秋季8—9 月栽培。若安裝空調、加濕器等設備則全年均可栽培。
2 菌種選擇及制作
2.1 菌種選擇
北冬蟲(chóng)夏草菌種退化很快,常規保存3~6 個(gè)月,傳代超過(guò)3~4 次,菌種性能就會(huì )嚴重退化導致栽培中出現不穩定性,因此生產(chǎn)上使用的母種一般都是向權威研究機構購買(mǎi),擴培繁殖3 代使用栽培后就得再次重新購買(mǎi)。不可隨意使用通過(guò)子實(shí)體組織分離等方法獲得的菌種,以免給生產(chǎn)帶來(lái)巨大風(fēng)險,甚至是不可挽回的損失。符合栽培條件的菌種為菌絲緊貼培養基生長(cháng)、顏色潔白、邊緣整齊、無(wú)明顯絨毛狀白色氣生菌絲、無(wú)雜菌感染,這樣的菌種抗逆性強,出草整齊,產(chǎn)量高。常用北冬蟲(chóng)夏草菌種的特點(diǎn)如表1 所示。
表1 北冬蟲(chóng)夏草栽培菌株品種特征
2.2 生產(chǎn)用菌種的制作
規?;a(chǎn)最好用液體菌種,以保證接種迅速,不易感染雜菌,同時(shí)具有接種面大且均勻、后期出草整齊、菌絲立體式占領(lǐng)料面等諸多優(yōu)勢。液體菌種可以在生產(chǎn)前直接找正規廠(chǎng)家購買(mǎi),也可以自己購買(mǎi)權威研究機構的母種進(jìn)行制作。
2.2.1 營(yíng)養液的配制。準備葡萄糖2%、蛋白胨0.5%、可溶性淀粉3%、磷酸二氫鉀0.2%、硫酸鎂0.2%、VB1 10mg,水100mL。取100 mL 水,煮沸后加入可溶性物質(zhì),再將可溶性淀粉調成糊狀緩慢加入,最后用5%氫氧化鈉調pH 值至6.5。以500 mL 罐頭瓶為容器,加入營(yíng)養液100 mL,搖瓶用的玻璃珠10 個(gè)左右,123 ℃下滅菌25~30 min 即可[2]。
2.2.2 液體菌種的接種與培養。營(yíng)養液冷卻后,無(wú)菌條件下在接種箱內用購買(mǎi)母種接種。一般每管母種可接種8~10 瓶液體菌種。接種后將液體菌種放置在20~25 ℃避光環(huán)境中靜置培養24~48 h,再移至搖床上震蕩培養,旋轉式搖床一般將轉速調至130~140 r/min,7 d 左右可以看到直徑2 mm的菌絲球均勻布滿(mǎn)營(yíng)養液。液體菌種不能放置時(shí)間太長(cháng),因此長(cháng)好的菌種7~10 d 內使用最佳。
3 栽培管理
3.1 栽培料及組成
培養基的基本成分是大米、小麥、酵母等,另外還可添加蠶蛹粉、蛋清、奶粉等動(dòng)物性營(yíng)養成分,可提高北冬蟲(chóng)夏草的產(chǎn)量和質(zhì)量。工廠(chǎng)化生產(chǎn)時(shí)可先在每個(gè)栽培瓶(罐頭瓶,規格750 mL 或500 mL)裝固體料30~25 g,再加營(yíng)養液60~65 mL。其配料及裝瓶量見(jiàn)表2、3。
表2 北冬蟲(chóng)夏草栽培1 000 mL 營(yíng)養液配方 〔g〕
注:上述配方中再各加入VB1和VB6各20 mg。
表3 北冬蟲(chóng)夏草栽培每瓶裝瓶量
3.2 裝瓶與滅菌
裝瓶后用0.05 mm 厚的聚丙烯塑料薄膜封口,用橡皮圈或細繩扎緊。采用高壓蒸汽滅菌,溫度123 ℃,時(shí)間1 h;常壓蒸汽滅菌,溫度100 ℃,時(shí)間8 h。培養基滅菌后的米粒不爛而松軟透氣。若水分過(guò)多,培養基太濕,菌絲不易吃透整個(gè)培養基,造成雜菌污染。如果太干,菌絲生長(cháng)緩慢,瓶?jì)刃夂蚋稍?,菌絲纖細無(wú)力,難以轉色出草。
3.3 接種及發(fā)菌管理
在無(wú)菌條件下,打開(kāi)封口膜,用消毒好的接種槍將液體菌種均勻噴在培養基上,接種量為10~15 mL。接種后在20~22 ℃溫度條件下,避光情況下將栽培瓶直立放置培養24~48 h,待菌絲萌發(fā)并定植后,擺放在培養架上培養。否則,培養液、培養基或菌液會(huì )倒向一側,后期出草不齊。菌絲萌發(fā)栽培瓶上架后即進(jìn)入發(fā)菌管理期。
由于北冬蟲(chóng)夏草具有趨光性,在擺放時(shí)要將瓶口朝向光源一側,一般以瓶口朝外側臥式擺放為宜,每層架上擺放5 層菌瓶,層架之間設置日光燈補充光照。發(fā)菌初期,室內溫度宜保持在15~18 ℃,可減少雜菌污染;15~20 d 菌絲長(cháng)滿(mǎn)料層后,將溫度調節到20~23 ℃,繼續培養。此階段濕度保持在65%~70%之間,通風(fēng)量以保證培養室內空氣清新為度。菌絲生長(cháng)階段不需要光線(xiàn),觀(guān)察到菌絲長(cháng)滿(mǎn)吃透培養料后,需要進(jìn)行照光以刺激菌絲由營(yíng)養生殖進(jìn)入生殖生長(cháng),但不能照光過(guò)早,以免影響產(chǎn)草量[4]。
3.4 轉色管理
經(jīng)15~20 d,白色菌絲布滿(mǎn)料面,培養基表面(氣生菌絲)出現一些小隆起時(shí)需要增加光照,促進(jìn)轉色[5-6]。白天利用自然散射光,光照強度為100~200 lx,光線(xiàn)不足可用日光燈做補充光源,每天光照時(shí)間不少于10 h,溫度21~23 ℃,相對濕度75%,同時(shí)用針在封口膜上刺10 個(gè)左右的小孔以利于氣體交換,5~7 d 即可在培養基上出現米粒狀原基并轉成橘黃色。注意轉色完成后要停止人工光照,連續光照會(huì )導致子座不容易長(cháng)出。
3.5 出草管理
溫度控制在18~22 ℃之間,不能超過(guò)28 ℃,否則不能形成子座;加大溫差刺激,白天室溫控制在18~22 ℃之間,晚上室溫降到8~10 ℃,每天低溫刺激6~10 h。每天通風(fēng)2~3 次,每次30~60 min,后期出草量大,呼吸增強,通風(fēng)時(shí)間適當延長(cháng);空氣相對濕度在80%~90%之間,光照每天12 h 以上,強度200~500 lx。若通風(fēng)差、光照強,則原基分化密,嚴重時(shí)形成菌被,不長(cháng)子座[9]。
3.6 采收加工
經(jīng)過(guò)15 d 左右,子座長(cháng)出表面,高度2~8 cm,直徑2~5 mm,整個(gè)子座呈橘紅色或橘黃色時(shí),頂部出現龜裂狀花紋,表面可見(jiàn)黃色粉末狀物表明已經(jīng)成熟,即可采收。采收后,停水3~4 d,在瓶?jì)茸⑷霠I(yíng)養液,10~20 d 后可長(cháng)出第2 批。采收后,除鮮售外,一般烘干包裝。
4 北冬蟲(chóng)夏草商品品質(zhì)標準
4.1 鮮品
子實(shí)體長(cháng)短較一致,結實(shí)干凈、顏色金黃、分布均勻,表面無(wú)白色菌狀物、未沾染金黃色以外的其他顏色,為上品。若表面有白色菌狀物則說(shuō)明老化,沾染金黃色以外的其他顏色說(shuō)明感染雜菌,為不良品。
4.2 干品
形狀特征:結實(shí)、粗細長(cháng)短均勻、單枝頂端無(wú)分叉、破碎率低,為上品。顏色:金黃色、橘黃色,顏色均勻,為上品,褐色、黑色不能食用。氣味:北冬蟲(chóng)夏草子實(shí)體有獨特的腥味,腥味越重,品質(zhì)越高。含水量:含水量12%以?xún)?,判斷辦法是用手輕捏子實(shí)體,有將斷未斷感覺(jué)。吉山花瑤